羧肽酶酶制劑商品供應主要來源于豬胰腺，但 價格昂貴。因此，利用微生物獲得大量的羧肽酶，具有 重要的現實意義。黑曲霉（Aspergillus niger）是國際上公 認的安全發(fā)酵微生物，且適合采用固態(tài)發(fā)酵的方式，而 黑曲霉生產羧肽酶發(fā)酵工藝條件鮮見報道。是在 前期篩選分離純化獲得的羧肽酶活力較高的黑曲霉（Aspergillus niger）H1-6的基礎上，利用固態(tài)發(fā)酵技術，優(yōu)化其 產酶發(fā)酵工藝參數，并考察發(fā)酵粗酶液在醬油釀造發(fā)酵中 的應用效果，為實現羧肽酶的規(guī)模化生產、降低成本來滿 足商業(yè)化的需要，對推動我國相關產業(yè)發(fā)展具有重要意義。SW-CJ-ZFD型雙人單面凈化工作臺：蘇州凈化設備有限 公司；DHP-9162型電熱恒溫培養(yǎng)箱：上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司；722N型可見分光光度計：上海精密科學儀器有限公司。

    當碳源為麩皮時，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活 力最高（640±32）mU/g，其他依次為玉米芯粉、米糠和甘蔗 渣；當氮源為豆粕時，羧肽酶的酶活力最高（703±11）mU/g， 其他依次為花生粕、玉米粉和菜籽油餅；無機鹽中的NaCl 對羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活力有正相關性，其他的K2PO3、 MgSO4、MnSO4 ·H2O、FeCl3 ·H2O和CaCl2則沒有影響；黑曲 霉接種量為1.0%時，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活力達到最高 （746±22）mU/g；初始pH值為6.5時，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶 活力最高（773±16）mU/g；水分含量為55%時，羧肽酶的固 態(tài)發(fā)酵酶活力最高（826±23）mU/g。根據Box-Behnken 試驗設計原理（中心組合試驗設計 原理），設計3因素5水平共20個試驗點的響應面分析試驗， 其中有14個析因點，6個零點重復，以羧肽酶酶活力（Y）為 響應值，以估計試驗誤差，分析黑曲霉H1-6固態(tài)發(fā)酵羧肽 酶活力的最佳條件。